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免疫学技术-单抗技术及其应用

作者: 发布人:王甫荣 发布时间:2019-04-10 18:45:05 阅读(15 1.00

疑难问题:在教学中,选修3是《现代生物技术专题》,需要重点关注生物技术,如基因工程技术、植物组织培养技术等,同时也要关注技术的应用。这次的选考加试中检测了杂交瘤技术,利用单抗识别抗原的特殊部位,特异性强。选修3教材中第33页“单抗可作为特异探针,研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能”。这是单克隆抗体的应用,首先需要了解什么是单抗,其次就是单抗的应用。

一、单克隆抗体制备原理

抗体主要由经过免疫过的B淋巴细胞合(效应B细胞)成。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,不同的效应B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇(抗原表位)分别激活各个具有不同的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的后代,即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克隆,并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。

效应B淋巴细胞能够产生抗体,但在体外不能进行无限分裂,而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代,但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。

二、单克隆抗体的应用

1.作为亲合层析的配体

单克隆抗体能与其相应的抗原特异性结合,因而能够从复杂系统中识别出单个成分。只要得到针对某一成分的单克隆抗体,利用它作为配体,固定在层析柱上,通过亲合层析,即可从复杂的混和物中分离、纯化这一特定成分。

2.作为生物治疗的导向武器

质体是由既亲水又亲油的两亲磷脂组成的连续双分子层微囊内含水相空间,可包裹水溶性物质。包有细胞毒剂的脂质体膜上偶联抗体,可定向攻击靶细胞,称为免疫脂质体。这种导向治疗,在动物试验与体外试验中已获得满意效果。

3作为免疫抑制剂

抗人T淋巴细胞单抗(McAb)作为一种新型免疫抑制剂,已广泛应用于临床治疗自身免疫疾病和抗器官移植的排斥反应。其作用机理有赖于McAb的种类及其免疫学特性。注射抗小鼠Thy-1抗原的单抗,可以抑制小鼠同种皮肤移植的排斥反应。

4.作为研究工作中的探针

单克隆抗体只与抗原分子上某一个表位(即抗原决定簇)相结合,利用这一特性就可把它作为研究工作中的探针。此时,可以从分子、细胞和器官的不同水平上,研究抗原物质的结构与功能的关系,进而并可从理论上阐明其机理。如用荧光物质标记单抗作为探针,能方便地确定与其结合的相应生物大分子(蛋白质、核酸、酶等)在细胞中的位置和分布。

5.增强抗原的免疫原性

1984年以来,Celis等发现,抗乙肝病毒(HBs)IgG可增强HBs抗原对特异性人T细胞克隆的刺激增殖,并可诱生干扰素。在小鼠中发现,当低剂量的HBs 抗原不产生免疫反应时,加入抗HBs抗体组成的复合物,则可有效地诱生免疫反应。根据这一作用,现已研制出乙肝的抗原抗体复合物型治疗性疫苗。

6.作为医学检验试剂

单克隆抗体作为医学检验试剂,更能充分发挥其优势。单克隆抗体的特异性强,大大提高了抗原抗体反应的特异性,减少了和其它物质发生交叉反应的可能性,使试验结果可信度更大。单抗的均一性和生物活性的单一性,使抗原-抗体区应结果便于控制,利于标准化和规范化。


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